两者在人体内的作用途径有所不同：1. 维生素D3：这是维生素D的主要形式，主要通过日光中的紫外线照射皮肤合成，也可以通过食物（如鱼肝油、脂肪鱼和强化食品）摄取。维生素D3进入体内后，先在肝脏中转化为25-羟维生素D3，这是一个储存和运输的形式。维生素D3补充剂则常见于预防维生素D缺乏。2. 骨化三醇：25-羟维生素D3随后在肾脏中进一步转化为骨化三醇，这是维生素D的生理活性形式。骨化三醇通常在需要快速纠正钙代谢异常或肾功能不全导致维生素D不足时使用。骨化三醇直接参与钙磷代谢，促进肠道对钙的吸收，维持血钙平衡，并影响骨骼重塑。由于骨化三醇是活性形式，剂量调整需要更谨慎，以防止高钙血症。在使用时，应根据医生的建议和个体状况来选择合适的制剂。
维生素D3是一种先锋药物，在体内需要经过肝脏和肾脏的两次羟化作用，转化为骨化三醇后，才能发挥其生物活性。而骨化三醇是由肾脏25-羟基维生素D3转变而来的重要代谢物，具有直接的生物活性，可以直接被身体利用，无需进一步转化。
两者都是治疗骨质疏松症的常用药物，为了提高疗效，经常与钙片联合使用，但是不能同时使用。儿童佝偻病或普通成年人的佝偻病可以服用维生素D3，老年人可以服用骨化三醇。
维生素D2主要来源于植物性食物，能促进小肠吸收钙磷。维生素D3则主要来源于动物性食物，此外，人体皮肤在阳光照射下也能合成维生素D3，其具有更高的生物活性。但是，维生素D2、D3都是D族类，均可通过口服或静脉内注射。因此，都可以促进人体骨头的发育。
维生素D3，作为一种重要的脂溶性维生素，对人体健康发挥着一定的积极作用。
1、主要参与钙磷代谢，促进肠道对钙的吸收，增强骨骼矿化，有利于预防和治疗佝偻病、骨质疏松等骨骼疾病。
2、维生素D3还具有免疫调节作用，能增强机体抵抗力，减少感染风险，维护免疫系统健康。
3、维生素D3与心血管疾病、糖尿病等慢性疾病的预防密切相关，适量补充维生素D3有助于降低这些疾病的发生风险。
患者在补充维生素D3时，应遵循医生建议，合理控制剂量，如果服用后，身体出现不适，应该及时就医。